分子生物學(xué)作為基因工程的上游技能,其試驗(yàn)的效果和準(zhǔn)確性將決議下流一切的進(jìn)程和結(jié)尾的試驗(yàn)成果。所以構(gòu)建一個(gè)齊備的分子生物學(xué)試驗(yàn)室是十分重要的,以下就讓咱們來(lái)看看構(gòu)建一個(gè)分子生物學(xué)試驗(yàn)室需求哪些儀器。
1. 冰箱: 依據(jù)藥品、試劑及多種生物制劑保管的需求,有必要具有不一樣控溫等級(jí)的冰箱,MAX常運(yùn)用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃合適貯存某些溶液、試劑、藥品等。-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。-80℃合適某些長(zhǎng)時(shí)間低溫保管的樣品、大腸桿菌菌種、純化的樣品、特別的低溫處置消化液等的保管。0-10℃的層析冷柜合適低溫條件下的電泳、層析、透析等試驗(yàn)。
2. 培育箱:37℃恒溫箱用于細(xì)菌的平板培育及分子生物學(xué)試驗(yàn)。
3. 恒溫培育搖床:用于大腸桿菌等生物工程菌種的擴(kuò)增。
4. 水浴鍋:用于保溫并進(jìn)行各類試驗(yàn)。
25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗(yàn),各種生物化學(xué)酶反響等試驗(yàn)的保溫。
含低溫的水浴槽能夠用于分子生物學(xué)的質(zhì)粒與基因片段的銜接等試驗(yàn)及用于42度的大腸桿菌感受態(tài)的熱激。
5. 烘箱:主用于烘干試驗(yàn)器皿,有些需求溫度高些,有些需求溫度低些。用于RNA方面的試驗(yàn)用具,需求在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干。
6. 超純水機(jī):跟著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展,許多試驗(yàn)對(duì)水純度的需求越來(lái)越高,用自來(lái)水、蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水,磁鐵耦合齒輪泵效果使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸剖析、DNA測(cè)序、酶反響、安排和細(xì)胞培育等。
7. 蒸汽消毒鍋:分子生物學(xué)所用大多數(shù)試劑,并且試驗(yàn)用具都應(yīng)嚴(yán)厲消毒滅菌。用于小批量物品的隨時(shí)消毒。大批試驗(yàn)物品、試劑、培育基可運(yùn)用大型消毒且守時(shí)進(jìn)行消毒。
8. 濾器濾膜:不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。
9.各種天平:臺(tái)秤、精細(xì)電子剖析天平,用于準(zhǔn)確稱量各類試劑。
10.液體體積的衡量:量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯、錐形瓶 等。
11.pH計(jì):測(cè)定溶液中H+的直接電位的儀器,首要經(jīng)過(guò)一對(duì)電極,在不一樣的pH溶液中發(fā)生不一樣的電動(dòng)勢(shì)用pH值表示出來(lái);
pH試紙:只適用于培育液、酚飽滿液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的大略估量。而大多數(shù)試劑的制作需求嚴(yán)厲的pH值,需準(zhǔn)確度高(小數(shù)點(diǎn)后兩位)的pH計(jì)。
12. 分光光度計(jì):光密度、分光光度計(jì)是運(yùn)用物質(zhì)在可見(jiàn)光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來(lái)判定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、丈量外表或顯現(xiàn)屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的便利目標(biāo)之一,經(jīng)過(guò)所發(fā)生的單色光而測(cè)定某一溶液對(duì)該單色光的吸收值,運(yùn)用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。OD值也能夠作為菌濃的檢測(cè)目標(biāo)。
13. 高速離心機(jī):MAX大轉(zhuǎn)速25000 r/m ,MAX大離心力89000g。有冷凍和常溫兩種,多用于制備和手搜集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。
14.超凈作業(yè)臺(tái):內(nèi)有紫外燈、照明燈、還應(yīng)有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設(shè)備,是一種供給部分潔凈度的設(shè)備。其原理是鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動(dòng)空氣,經(jīng)過(guò)低、中效的過(guò)濾器后,經(jīng)過(guò)作業(yè)臺(tái)面,使試驗(yàn)操作區(qū)域變成無(wú)菌的環(huán)境。
15.電泳體系:電泳技能是檢測(cè)、判定各種生物大分子的純度、含量及描繪它們的特征,乃至仍是別離、純化、收回和濃縮樣品的東西之一。
電泳體系分為電源和電泳槽,電源需經(jīng)穩(wěn)流經(jīng)過(guò)穩(wěn)壓器,既能供給安穩(wěn)的直流電,又能輸出安穩(wěn)的電壓;水平式電泳槽:通常分為微型電泳槽和大號(hào)水平式電泳槽
16.PCR儀:Polymerase Chain Reaction儀,也稱DNA熱循環(huán)儀,基因擴(kuò)增儀,它是使一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩邊,然后酶促組成拷貝數(shù)百萬(wàn)倍的靶序列DNA基因片段,它的每一循環(huán)包含在三種不一樣溫度進(jìn)行的DNA變性,引物復(fù)性,DNA聚合酶催化的延伸反響三個(gè)進(jìn)程。需求闡明的是,有些試驗(yàn)室能夠還需求梯度PCR儀或?qū)嵤露繜晒釶CR儀來(lái)進(jìn)行一些特別的分子生物學(xué)試驗(yàn)。
17.凝膠成像系統(tǒng):上海kunke凝膠成像系統(tǒng)是一個(gè)不錯(cuò)的挑選,檢測(cè)靈敏度能到pg級(jí)(紫外和EB只能到5ng),并且不必紫外和EB,更安全,操作和拍照十分便利。
18.其他設(shè)備
1. 微波爐:便于一些溶液的疾速加熱和定溫加熱,電泳瓊脂糖凝膠制作、溶化等。
2. 制冰機(jī):用于制作大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的試驗(yàn)操作所需的低溫環(huán)境,以削減核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。
3. 層析設(shè)備:(色譜別離)是一種別離多組分混合物的有用物理辦法。
真空印記體系,DNA組成/測(cè)序儀:這些都是對(duì)核酸進(jìn)行深入研究的*儀器。
4. 磁力攪拌器:多角度旋轉(zhuǎn)混勻器、疾速振動(dòng)混合器:用于混合儀器。
5. 勻漿器:超聲安排及細(xì)胞破碎器,用其進(jìn)行樣品的別離提純?cè)囼?yàn)。
6. 通風(fēng)櫥:許多溶劑能逸出毒氣,*柜 ,放射性試驗(yàn)還要有有機(jī)玻璃屏蔽。
7. 玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器:用于酚等有機(jī)溶劑的蒸餾。
8. Tip頭、Eppendorf管: 微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗刷,硅化消毒后重復(fù)運(yùn)用。對(duì)一些需求嚴(yán)厲的試驗(yàn),如RNA的獲取、保管等操作,應(yīng)運(yùn)用新的消毒tip頭與Eppendorf管。別的還應(yīng)備有常用標(biāo)準(zhǔn)的離心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細(xì)胞培育塑料平板等。
9. 小型設(shè)備、用具:
守時(shí)器、濾膜、保鮮膜、防護(hù)眼鏡鴨嘴鑷、慣例的玻璃或塑料器皿(包含平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保管的試劑應(yīng)運(yùn)用棕色試劑瓶,如飽滿酚、巰基乙醇等)、記號(hào)筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)
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