1、培養(yǎng)基的制備
培養(yǎng)基是指人們根據(jù)微生物生長繁殖所需的各類營養(yǎng)物質(zhì),按一定的濃度由人工方法混合配合而成的用于培育微生物生長的一類營養(yǎng)基質(zhì)而稱之。培養(yǎng)基是微生物生長的物質(zhì)基礎(chǔ),是微生物檢測工作的重要基礎(chǔ)工作。按使用時的不同物理狀態(tài),培養(yǎng)基可分為:液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基3種。根據(jù)不同用途(使用目的),培養(yǎng)基又可分為:基礎(chǔ)培養(yǎng)基、富集培養(yǎng)基(營養(yǎng)或增殖培養(yǎng)基)、選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、厭氧培養(yǎng)基5類 。另外按其營養(yǎng)成分和濃度是否已知可分為:合成培養(yǎng)基(營養(yǎng)成分和濃度已知)、天然培養(yǎng)基(營養(yǎng)成分和濃度未知)2種。有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識可參考有關(guān)專著和其他有關(guān)微生物學教科書。
2、培養(yǎng)基的儲存
一般來說,未開封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲存。已配制好的培養(yǎng)基、緩沖液一般可儲存于生化培養(yǎng)箱2—25℃陰涼干燥處,有條件置冰箱冷藏儲存更好,否則必須在2d內(nèi)使用完畢。USP中有明確規(guī)定:置2—25℃陰涼干燥處如果培養(yǎng)基分裝并儲存于非密閉性容器內(nèi)(如試管、三角燒瓶),則其使用期限為1個月,但該培養(yǎng)基 的靈敏度試驗和其他 的相關(guān)質(zhì)量檢查務(wù)必在距使用時的前2周內(nèi)完成;如果培養(yǎng)基儲存于密閉性容器(如螺旋蓋瓶)內(nèi),則其使用期限為1年,但該培養(yǎng)基的靈敏度試驗和其他的相關(guān)質(zhì)量檢查須在距使用前3個月內(nèi)完成:如果實驗室購買的成品型培養(yǎng)基儲存于密閉容器內(nèi),實驗室可抽取部分代表性樣品進行無菌檢查試驗和靈敏度試驗。并根據(jù)自己的儲存條件來制定合理的培養(yǎng)基儲存期,對培養(yǎng)基的存儲環(huán)境條件進行監(jiān)控和記錄,并且要對相應(yīng)的儲存期和儲存條件進行確認。
滅菌后的培養(yǎng)基等物品應(yīng)置適當條件下保存至規(guī)定的有效期,并對保存條件進行確證。
表 無菌物品的存儲條件
類型 存放條件 無菌保效期(年、月、d)
輸液瓶密封裝培養(yǎng)基 2—8℃ 1年
輸液瓶密封裝淋洗液、緩沖液 室溫 2年
螺旋蓋瓶裝培養(yǎng)基 2—8℃ 3個月
螺旋蓋瓶裝淋洗液、緩沖液 室溫 3個月
試管裝無菌培養(yǎng)基(固液) 2—8℃ 14d
試管裝有其他的無菌試劑 室溫 14d
平皿瓊脂培養(yǎng) 25—35℃電熱恒溫培養(yǎng)箱下培養(yǎng)3d后,存于2—8℃ 14d
取樣用螺旋蓋瓶 室溫 7d
過濾器等無菌操作用物品 室溫,潔凈室 內(nèi)或?qū)恿髋_內(nèi) 7d
表 培養(yǎng)基2—8℃條件保存期限
培養(yǎng)基種類 保存條件 保存時間
平板培養(yǎng)基 不袋裝 2周
袋裝 6—8周
試管培養(yǎng)基 不袋裝 2—4周
(棉塞) 袋裝 8—10周
試管培養(yǎng)基 不袋裝 8周
(軟木塞或蠟封) 袋裝 16—18周
有效期已過的培養(yǎng)基、緩沖液、稀釋液、淋洗液和試劑必須立即丟棄,不得再用于檢測中。實驗室應(yīng)建立簡易的庫存控制系統(tǒng),有專人保管和建立臺賬,包括品名、規(guī)格、批號、數(shù)量、有效期、進貨日期、使用日期和數(shù)量、以及領(lǐng)用人等信息,以隨時掌握有關(guān)信息。
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