乳糖發(fā)酵實驗是常用的鑒別微生物的生化反應,在腸道細菌的鑒定上尤為重要,是初步鑒定腸道致病菌與非致病菌常用的試驗。應用于食品,環(huán)境行業(yè)比較多。下面小喆給大家介紹一下水質檢測的實驗方法,供大家參考。
一、乳糖發(fā)酵實驗
1、取10ml水樣接種到10ml雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,取1ml水樣接種到10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,另取1ml水樣注入到9ml滅菌生理鹽水中,混勻后吸取1ml(即0.1ml水樣)注入到10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,每一稀釋度接種5管。對已處理過的出廠自來水,需經常檢驗或每天檢驗一次的,可直接種5份10ml水樣雙料培養(yǎng)基,每份接種10ml水樣。
2、檢驗水源水時,如污染較嚴重,應加大稀釋度,可接種1,0.1,0.01ml甚至0.1,0.01,0.001ml,每個稀釋度接種5管,每個水樣共15管。接種1ml以下水樣時必須作10倍遞增稀釋后,取1ml接種,每遞增稀釋一次,換用1支1ml滅菌刻度吸管。
3、將接種管置36±10℃電熱恒溫培養(yǎng)箱內,培養(yǎng)24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產氣產酸,則可報告為總大腸菌群陰性,如有產酸產氣者,則按下列步驟進行。
二、分離培養(yǎng):經培養(yǎng)24h后,將產酸產氣的發(fā)酵管,分別接種于伊紅美藍平板上,在36±10℃電熱慍溫培養(yǎng)箱中8h-24h,觀察形態(tài),挑取數個可疑菌落進行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。
三、證實試驗:挑取可疑管接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,置于36±10℃慍溫箱中培養(yǎng)24h±2h,有產酸產氣者,即證實有總大腸菌群存在。